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[의학,약학]생물학 - 식물세포와 동물세포의 관찰
생물학 - 식물세포와 동물세포의 관찰
[1] 실험 목적 및 서론
식물세포인 양파 표피세포와 동물세포인 구강상피세포를 재료로 모든 생물체의 가장 기본적인 단위인 세포의 구조를 알아보고 동식물 세포의 차이점을 알아보려 한다. 또한 광학현미경 사용법을 익히고 세포를 고정시키는 원리를 알아보려 한다.
[3] 실험 재료 및 기구
광학현미경
슬라이드 글라스, 커버글라스, 핀셋, 면도날, PBS, Kimwipes, 70% ethanol, Methylene blue, 양파, 면봉
[4] 실험방법
(1) 양파 상피 세포의 관찰
① 슬라이드 글라스 위에 PBS를 한 방울 떨어뜨린다.
② 양파를 면도날을 사용하여 가로와 세로가 각각 5MM가 되도록 ＃ 모양으로 잘라,
핀셋을 이용하여 슬라이드 글라스 위에 떨어뜨려놓은 PBS 위에 올린다.
③ 양파 표피 세포 위에 PBS를 한 방울 떨어뜨린다.
④ Kimwipes 를 이용하여 PBS를 빨아들인...생물학 - 식물세포와 동물세포의 관찰
[1] 실험 목적 및 서론
식물세포인 양파 표피세포와 동물세포인 구강상피세포를 재료로 모든 생물체의 가장 기본적인 단위인 세포의 구조를 알아보고 동식물 세포의 차이점을 알아보려 한다. 또한 광학현미경 사용법을 익히고 세포를 고정시키는 원리를 알아보려 한다.
[3] 실험 재료 및 기구
광학현미경
슬라이드 글라스, 커버글라스, 핀셋, 면도날, PBS, Kimwipes, 70% ethanol, Methylene blue, 양파, 면봉
[4] 실험방법
(1) 양파 상피 세포의 관찰
① 슬라이드 글라스 위에 PBS를 한 방울 떨어뜨린다.
② 양파를 면도날을 사용하여 가로와 세로가 각각 5MM가 되도록 ＃ 모양으로 잘라,
핀셋을 이용하여 슬라이드 글라스 위에 떨어뜨려놓은 PBS 위에 올린다.
③ 양파 표피 세포 위에 PBS를 한 방울 떨어뜨린다.
④ Kimwipes 를 이용하여 PBS를 빨아들인다.
⑤ 70% ethanol을 조금 떨어뜨리고 약 3분 정도 고정시킨다.
⑥ Kimwipes를 대고 여분의 ethanol 용액을 빨아들인다.
⑦ PBS를 조금 떨어뜨려 ethanol을 세척한 후,
Kimwipes를 대고 여분의 PBS를 빨아들인다.
⑧ Methylene blue 용액을 조금 떨어뜨린 후, 커버 글라스를 덮는다.
⑨ Kimwipes를 이용하여 여분의 Methylene blue 용액을 제거한다.
현미경을 이용하여 저배율에서 고배율로 관찰한다.
※프레파라트 제작법
커버글라스의 한 변을 슬라이드 글라스에 대고 약 45° 기운 상태에서 천천히 덮는다. 이때 기포가 들어가지 않도록 주의한다.
(2) 구강 상피세포의 관찰
① 슬라이드 글라스 위에 PBS를 한 방울 떨어뜨린다.
② 면봉을 사용하여 입 안 뺨 부분을 가볍게 긁는다.
③ 면봉에 묻은 상피세포를 슬라이드 글라스에 넓게 펼친다.
④ 약 2~3분간 방치 후, 70% ethanol을 떨어뜨리고 3분간 고정시킨다.
⑤ 고정 후, 슬라이드 글라스를 한 쪽으로 기울여 여분의 ethanol을 제거한다.
⑥ 슬라이드 글라서에 PBS를 한 두 방울 떨어뜨려 ethanol을 세척한 후,
다시 슬라이드 글라스를 기울여 여분의 PBS를 제거한다.
⑦ Methylene blue 용액을 한 두 방울 떨어뜨린 후,
기포가 생기지 않도록 조심하여 커버글라스를 덮어준다.
⑧ 3분간 염색한다.
⑨ Kimwipes를 이용하여 여분의 Methylene blue 용액을 제거한다.
현미경을 이용하여 저배율에서 고배율로 관찰한다.
[5] 실험결과
양파 표피세포
구강 상피세포
현미경으로 본 세포는 뚜렷이 구별되는 구조를 가지고 있었다. 각 세포는 경계선을 가지고 있었는데, 이는 막의 존재를 시사한다. 식물세포인 양파표피세포는 정형화된 모양이었고, 동물세포인 구강상피세포는 비교적 자유롭고 불규칙한 모양이었다. 식물세포는 세포벽(cell wall)과 식물세포막(plasmalemma)을 가지고 있고, 동물세포는 세포막(Cell membrane or plasma membrane)을 가지고 있는 것이 그 이유이다.
세포의 중앙에는 메틸렌블루(Methylene blue)에 의해 염색된 둥근 형태의 핵(nucleus)이 나타났고, 핵을 제외한 주변의 나머지부분에는 세포질(cytoplasm)이 나타났다. 세포질에는 다양한 크기의 미세물질들이 잔뜩 혼합되어있는 것처럼 보였다.
또한, 배율을 높일수록 상이 어두워지는 것을 볼 수 있었다.
[6] 고찰
1. 동물세포와 식물세포의 공통점과 차이점
식물세포
동물세포
공통점
진핵세포(Eukaryotic Cell)이다.
차이점
섬유소가 주성분인 두꺼운 세포벽을 가지고 있다.
물질의 저장소 역할을 하는 액포가 발달되어있다.
광합성에 필요한 엽록체를 가지고 있다.
대부분 운동이나 세포 분열에 관여하는 중심체를 가지고 있다.
진핵세포(Eukaryotic cell) 란
진핵세포는 세포 내에 핵으로 대표되는 다양한 세포소기관을 가진 세포들을 통칭하는 이름이다. 진핵세포는 다양한 형태, 크기 및 생리 기능을 가진다. 또한, 일반적으로 원형질 막, 세포질, 미토콘드리아, 골지체, 리보솜 등의 세포내 소기관으로 구성되어 있다.
세포벽이란
- 식물세포에서만 관찰된다.
- 반강체이다.
- 세포의 외부피복이다.
- 세포 자체에서 만들어졌다.
- 셀룰로오스라고 하는 복잡한 다당류의 탄수화물을 포함한다.
2. PBS란 무엇이며, 이번 실험에 PBS를 사용한 이유
PBS란 Phosphate Buffered Salined의 약자로, 이온 농도를 유지시켜주며 pH 변화의 완충 작용을 해 주는 역할을 한다. 급격한 수소이온농도의 변화는 효소의 주성분인 단백질의 기능에 큰 영향을 끼치는데, 이러한 현상을 방지하기 위해 PBS를 사용하였다. 또한, 완충액은 고정액의 침투성과 염색성을 높이는 중요한 역할을 한다.
3. 고정(fixation)의 목적과, 고정 시 사용되는 시약
세포 또는 조직의 형태를 가능한 한 살아있는 것에 가까운 상태에 가까운 상태로 보존하기 위하여 고정을 한다. 고정은 크게 나누어 물리적 고정(physical fixation)과 화학적 고정(chemical fixation)으로 구분할 수 있다. 현 실험에서는 후자의 고정 방법이 사용되었다. 화학적으로 고정시키는 시약은 응고성과 비응고성 고정제로 구분된다. 응고성 고정제(coagulant fixative)에는 에탄올, 메탄올, 아세톤, 피크르산, 염화수은 등이 있고, 비응고성 고정제(non-coagulant fixation)에는 포르말린, 아세트산, 글루타르알데히드 등이 있다.
※광학현미경 사용시의 일반적 유의사항
1) 현미경은 두 눈으로 본다.
현미경을 두 눈으로 보는 것은 특히 스케치할 때에 중요하다. 한 눈을 감거나 혹은 한 손으로 눈을 가리고 검경
자료출처 : http://www.ALLReport.co.kr/search/detail.asp?pk=11082955&sid=ddangkung&key=
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